抑制基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)
MMPs主要負(fù)責(zé)細(xì)胞外基質(zhì)的降解,尤其是構(gòu)成真皮結(jié)構(gòu)的膠原纖維與彈力纖維,胞外囊泡粒徑及濃度檢測,故MMPs是調(diào)節(jié)皮膚光老化的主要靶標(biāo)之一。
外泌體對MMPs的調(diào)節(jié)能減少真皮層彈性和膠原纖維的損傷,改善真皮層老化。
通過減少氧化應(yīng)激來延緩皮膚衰老
紫外線輻射可產(chǎn)生大量ROS(即活性氧),影響真皮成纖維細(xì)胞功能,誘導(dǎo)MMPs合成,損傷細(xì)胞外基質(zhì)成分(如膠原蛋白、彈力蛋白等)。衰老成纖維細(xì)胞較正常細(xì)胞可產(chǎn)生更多ROS。
國際細(xì)胞外囊泡學(xué)會(ISEV) 在2014年的提議,對于提取獲得的外泌體,需要通過以下手段進(jìn)行確認(rèn):
雙層囊膜結(jié)構(gòu)是外泌體重要標(biāo)志之一,但普通光學(xué)顯微鏡難以觀察到此種亞顯微結(jié)構(gòu)。而透射電子顯微鏡 (Transmission electron microscope, TEM) 分辨率可達(dá)0.1 ~ 0.2 nm,可將被觀察物體放大至數(shù)百萬倍,非常適合進(jìn)行外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀測。
表觀生物技術(shù)團(tuán)隊擁有豐富的外泌體電鏡樣本處理與鑒定經(jīng)驗,可為客戶提供高質(zhì)量外泌體TEM檢測服務(wù),獲得樣本中外泌體典型形態(tài)特征圖片 (如圖一)。
外泌體電鏡檢測:外泌體是細(xì)胞外囊泡的一種,其膜來源與粒徑范圍與細(xì)胞外囊泡相似,電鏡下,顯示出典型的茶托狀超微結(jié)構(gòu)。
透射電鏡作為鑒定外泌體的金標(biāo)準(zhǔn),一直是科銳諾生物主營的業(yè)務(wù)之一。透射電鏡點(diǎn)分辨率可以達(dá)到0.1nm,非常適合用來觀察外泌體類囊泡??蛻糁恍枰乃托迈r或者凍存的外泌體樣品,我們負(fù)責(zé)從制片到觀察的全套檢測服務(wù)。經(jīng)過多年實(shí)操與研發(fā)經(jīng)驗,科銳諾已經(jīng)熟練掌握外泌體電鏡檢測。做過的樣品來源包括:常規(guī)細(xì)胞上清、外周血、尿液、腦脊液、肺泡灌洗液、組織提取液、乳液、汗液等來源的外泌體。分離方法包括:PEG沉淀法、蔗糖密度梯度離心法、差速超1速離心法、色譜柱法、親合法、超濾法、切向流、微流控等。對于不同來源,不同方法的樣品,實(shí)驗前,會進(jìn)行詳細(xì)溝通及結(jié)果預(yù)估。結(jié)合NTA數(shù)據(jù),電鏡效果非??煽壳铱煽亍?測試周期為3-7個工作日。
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